簡介
需要的其他材料
樣品保存
樣品收集后若在 1 周內(nèi)進行檢測的可保存于4℃,若不能及時檢測,請按一次使用量分裝,凍存于-20℃(1個月內(nèi)檢測),或-80℃(6個月內(nèi)檢測),避免反復凍融,標本溶血會影響最后檢測結(jié)果,因此溶血標本不宜進行此項檢測。
試劑盒中取出標準品,準備7個試管,先從400ng/mL標準品(200μL)按需吸取一定量用1×稀釋液稀釋至20ng/mL(例:50μL的標準品母液+950μL的1×稀釋液,制備得到1000μL的20ng/mL濃度標準品),隨后在6個試管中分別加入500μL的1×稀釋液,在這6個單獨的試管中將20ng/mL標準品依次2倍倍比稀釋至6個梯度,共配制7個濃度的標準品,依次為: 20ng/mL、 10ng/mL、 5ng/mL、 2.5ng/mL、 1.25ng/mL、 0.625ng/mL、 0.313ng/mL,從最高濃度標準品溶液中吸取500μL標準品到下一個試管中,輕輕吹打混勻,以此類推進行標準品的倍比稀釋(如圖所示),1×稀釋液用作零濃度標準品(0ng/mL)。

使用前10分鐘,將100×生物素化抗體于1000×g離心1分鐘,隨后用1×稀釋液將100×生物素化抗體稀釋成1×生物素化抗體工作液,根據(jù)所需用量當日配置當日使用。
結(jié)果的計算
以下數(shù)據(jù)和曲線僅供參考,實驗者需根據(jù)自己的實驗數(shù)據(jù)建立標準曲線。
標準品濃度(ng/mL)
20
10
5
2.5
1.25
0.625
0.313
0
OD值
2.497
1.634
1.026
0.683
0.377
0.299
0.15
0.068
校正OD值
2.429
1.566
0.958
0.615
0.309
0.231
0.082
0
下圖所示標準曲線僅供示例,結(jié)果計算應以同次試驗標準品所繪標準曲線為準計算樣本結(jié)果
重復性
靈敏度
特異性
使用ELISA試劑盒之前,請您必須完整閱讀說明書,本產(chǎn)品僅供科研使用,不能于臨床診斷或治療。